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養(yǎng)細胞的小伙伴們都知道，細胞一定要傳代，因為細胞在培養(yǎng)過程中不斷的繁殖，數(shù)量也隨之增加，然而培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶的空間有限，增殖受到抑制，所以必須將一部分細胞移至別的培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶，讓細胞有足夠生長空間。  
細胞傳代也不僅僅是為細胞安一個更大的“家"，更重要的，是使細胞系或細胞株進一步增殖，這樣，我們才能有足夠的細胞做各種各樣的實驗。  
但是，對于傳代的時間，很多小伙伴都掌握不好，因為對于不同的細胞來說，判斷能否開始傳代的標準略有不同，今天，我們就主要來聊一下，細胞傳代的時間問題。  
什么時候進行細胞傳代?  
對于貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)而言，判斷是否需要傳代主要看以下2個方面：  
?細胞密度：  
貼壁培養(yǎng)細胞進入對數(shù)生長期、未達到匯合狀態(tài)時即應進行傳代，正常細胞達到匯合狀態(tài)時會停止生長(接觸抑制)，重新接種后需要較長時間才能恢復，轉化細胞即使達到匯合狀態(tài)也能繼續(xù)增殖，但是在經(jīng)過大約兩個倍增時間后通常會變質。類似地，  
懸浮培養(yǎng)的細胞進入對數(shù)生長期、未達到匯合狀態(tài)時也應進行傳代。達到匯合狀態(tài)時，懸浮培養(yǎng)的細胞會聚集成團塊，轉動培養(yǎng)瓶時培養(yǎng)基會變得渾濁。  
?培養(yǎng)基耗竭：  
生長培養(yǎng)基pH值降低通常表示乳酸蓄積，乳酸是細胞代謝的副產(chǎn)物。乳酸有細胞毒性，而且pH值降低也是細胞生長的不利因素。pH值改變的速度通常取決于培養(yǎng)體系中的細胞濃度，細胞濃度越高，培養(yǎng)基耗竭的速度越快。  
如果發(fā)現(xiàn)pH值迅速降低(>0.1–0.2pH單位)，同時細胞濃度增大，則應對細胞進行傳代。

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