人妻综合网,深夜影院操一操,中文字幕有码在线播放,欧美精品第1页

核酸的檢測目前仍然主要是使用溴化乙錠這類核酸染色劑及紫外光照射。然而，紫外線對核酸的降解已有很多文獻(xiàn)報(bào)道，因此可以認(rèn)為它本身就是一種核酸破壞劑。此外，紫外線對使用者來說也具有危險(xiǎn)性。因此總的來說，目前的這類核酸檢測技術(shù)會(huì)由于DNA分子的破壞，而導(dǎo)致如測序、克隆等多種下游應(yīng)用的效率大大降低。無害化的可見光已經(jīng)被用于檢測核酸，其主要局限性是只能激發(fā)綠色染料。以其開發(fā)的全新安全核酸染料MIDORIGreen而聞名的NIPPON Genetics EUROPE公司，針對目前的核酸檢測技術(shù)開發(fā)了一種全新的核酸染料檢測方法，它能夠激發(fā)所有商用核酸染料。
紫外燈的危害性
DNA能夠吸收紫外光譜中的光。其結(jié)果是形成嘧啶二聚體；單鏈DNA和雙鏈DNA斷裂，DNA與DNA發(fā)生鏈間交聯(lián)和DNA與蛋白質(zhì)發(fā)生交聯(lián)。雖然生物體能夠修復(fù)這些DNA損傷并承受上述后果，但瓊脂糖凝膠中的DNA缺乏這些修復(fù)機(jī)制。此外，與整個(gè)生物體相比，凝膠中的DNA量要少得多。下面是對短期紫外線照射引起的DNA降解的研究結(jié)果：電泳后，凝膠暴露在紫外線下長達(dá)60秒。PCR產(chǎn)物隨后被分離并克隆到一個(gè)對照載體中，之前用NdeI和HindIII進(jìn)行雙酶切，然后被克隆并轉(zhuǎn)染到大腸桿菌DH5α(BL21)細(xì)胞中。結(jié)果如下:
暴露在紫外線下的DNA受損嚴(yán)重，克隆效率明顯降低。紫外照射60s后，DNA含量比空對照組要少得多。因此，我們確認(rèn)了紫外線照射引起的DNA降解并且*破壞DNA。
一代技術(shù)---藍(lán)色LED
2009年，科研界引入了藍(lán)光發(fā)光二極管（LED）透射器。LED是能將電轉(zhuǎn)化為光的半導(dǎo)體。其優(yōu)點(diǎn)是波長，效率*，平均壽命高達(dá)50000小時(shí)。它們發(fā)射出比紫外線波長更長的470nm波長的光。
重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)，并將DNA暴露在藍(lán)色LED燈下相同時(shí)間：
正如理論所預(yù)期的那樣，暴露后每板CFU的數(shù)量沒有任何顯著變化。因此，防止DNA損傷大大提高了克隆效率。
藍(lán)色LED的問題
雖然使用了更為安全的光源，但使用藍(lán)色LED也有一個(gè)主要缺點(diǎn)。溴化乙錠，常見的DNA染色法，在藍(lán)光激發(fā)下其結(jié)果往往比紫外要差很多。溴化乙錠與DNA結(jié)合的激發(fā)峰在480～525nm之間。如結(jié)果所示，溴化乙錠與DNA結(jié)合的信號(hào)非常微弱，幾乎無法使用。綠色DNA染料，如MIDORIGreen染料，通過藍(lán)色LED可以提供更好的信號(hào)。
凝膠成像儀
http://www.best-sciences.cn/SonList-2087252.html