1、原理及適用范圍
沙門氏菌屬腸道細(xì)菌科,包括那些引起食物中毒、導(dǎo)致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細(xì)菌。能引起食物傳播性疾病,近年來,已經(jīng)成為最常見的食物中毒原因。腸炎沙門氏菌感染通常源于奶制品、禽產(chǎn)品和肉產(chǎn)品;雞肉和雞蛋尤其是高風(fēng)險(xiǎn)食品。沙門氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現(xiàn)問題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續(xù)7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時(shí)服用抗生素類藥品,沙門氏菌感染將導(dǎo)致生命危險(xiǎn)。沙門氏菌測(cè)試片(FilmplateTMSalmonella BS205)含有選擇性培養(yǎng)基、沙門氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運(yùn)用微生物測(cè)試片專有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否帶有沙門氏菌,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門和食品企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于肉和肉產(chǎn)品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測(cè)。參照標(biāo)準(zhǔn):食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門氏菌檢驗(yàn)(GB/T4789.4-2010)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將沙門氏菌測(cè)試片(BS205)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng): 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍(lán)色的菌落為其他菌群。出現(xiàn)陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、結(jié)果報(bào)告
在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。
5、附加說明
5.1、有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍(lán)色,葡萄球菌不生長(zhǎng)。
5.2、測(cè)試片具有較強(qiáng)的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時(shí)仍可計(jì)算出菌落。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰,復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2006,16(8):954-955)。
5.3、陽性確認(rèn)試驗(yàn)推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測(cè)試片上可疑的沙門氏菌菌落,在對(duì)應(yīng)上蓋膜上做好標(biāo)記并編號(hào)。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報(bào)告25g樣品沙門氏菌陽性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽性,報(bào)告25g被檢樣品沙門氏菌陰性。
5.4、注意使用過的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
6、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質(zhì)期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,最好在拆封前將整包回溫至室溫。