集裝箱實驗室是一種比較新型的建筑體系,外形酷似集裝箱,用傳統(tǒng)貨柜箱改造成的PCR實驗室,是對集裝箱的增值利用,特點是非常堅固,可以承受較大的壓力??稍诠S基本完成安裝,通過汽車將成品運輸?shù)浆F(xiàn)場,可以拼接,運輸?shù)臅r候也直接吊裝即可,十分方便。國家提倡“綠色環(huán)保、低碳節(jié)能”的理念,臨時場地用集裝箱實驗室滿足應(yīng)急檢驗的需求。且可以再次利用,拆裝方便,性能優(yōu)越,穩(wěn)定牢固,防震性能好,成本相對來說較低,也十分的安全。
一般裝配式核酸檢測實驗室采用標準集裝箱嚴格按照PCR實驗室要求進行設(shè)計,并設(shè)置洗消間,高度集成水、電、風、設(shè)備等專業(yè);箱體內(nèi)配備照明、紫外燈、臺柜、設(shè)備、冰箱等;送風管在箱體內(nèi)一體成型,在箱體外通過專門構(gòu)件連接;排風單獨設(shè)置,風柱集成排風機;當用作車載實驗室使用時,排水裝置采用收集裝置,定時通過污物出口取出;當運輸?shù)浆F(xiàn)場固定使用時,排水管道與所在單位的生物廢水處理池連通。98%建造工作在工廠完成,運輸?shù)浆F(xiàn)場只需要平整的場地,必要的水電對接即可完成安裝。
(一) 臨床基因擴增檢驗實驗室原則上分為四個分隔開的工作區(qū)域:
1、試劑貯存和準備區(qū)
2、標本制備區(qū)
3、擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)
4、擴增產(chǎn)物分析區(qū)
如使用全自動分析儀,區(qū)域可適當合并。
(二)各工作區(qū)域必須有明確的標記,避免不同工作區(qū)域內(nèi)的設(shè)備、物品混用。
(三)進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行,即試劑貯存和準備區(qū)→標本制備區(qū)→擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。
(四)不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開各工作區(qū)域時,不得將工作服帶出。
二、工作區(qū)域儀器設(shè)備配置標準
(一)試劑貯存和準備區(qū)
1、2~8℃和-15℃冰箱
2、混勻器
3、微量加樣器(覆蓋l~1000ul)
4、移動紫外燈(近工作臺面)
5、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)
6、專用工作服和工作鞋
7、專用辦公用品(二)標本制備區(qū)
1、2~8℃冰箱、-20℃或-80℃冰箱
2、高速臺式冷凍離心機
3、混勻器
4、水浴箱或加熱模塊
5、微量加樣器(覆蓋1~1000ul)
6、可移動紫外燈(近工作臺面)
7、超凈工作臺
8、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)
9、專用工作服和工作鞋
10、專用辦公用品 如需處理大分子DNA,應(yīng)備有超聲波水浴儀。(三)擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)
1、 核酸擴增儀
2、 微量加樣器(覆蓋1~1000ul)
3、 可移動紫外燈(近工作臺面)
4、 消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心) 5、專用工作服和工作鞋
6、專用辦公用品
PCR實驗室建設(shè)四要素
1 試劑準備區(qū)
用于試驗試劑的準備。該區(qū)域為正壓,目的是防止污染物質(zhì)溢入。該區(qū)域內(nèi)部又可分為3個區(qū)域:普通提取試劑的準備區(qū)、PCR試劑準備區(qū)和PCR主反應(yīng)液準備區(qū)。在普通提取試劑的準備區(qū)內(nèi)準備一些樣品核酸提取時所需的裂解液、提取液等;PCR試劑準備區(qū)用于PCR試劑的制備和保存。例如準備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染,避免反復冷凍和解凍,試劑存貯溶液應(yīng)該被平均為小的工作體積,儲存在這個房間以備后用:PCR主反應(yīng)液準備區(qū)將進行主反應(yīng)混合液(除了樣品。所有PCR所需試劑的混合)添加到PCR管的操作。重要提示:不能將其它房間的材料(包括擴增、模板和目標核酸或陽性對照、供應(yīng)品、或設(shè)備)帶進試劑準備區(qū)。
2 樣品準備區(qū)
該區(qū)域無壓力設(shè)置要求。該區(qū)域是用于對樣品進行分樣,將樣品進行研磨、粉碎、勻漿的區(qū)域。由于在這些粉碎、研磨和勻漿處理過程中會產(chǎn)生氣溶膠,因此,存在陽性樣品污染后續(xù)操作的可能性。該區(qū)域與后面的區(qū)域應(yīng)嚴格隔離,應(yīng)放在與后面的三個區(qū)域隔開的獨立的房間中。在樣品準備區(qū)內(nèi)還可設(shè)立一個專用的封閉區(qū)或房間用于樣品的接收和儲存。這個房間可以放置冰箱用于樣品儲存,應(yīng)該和樣品準備區(qū)其它區(qū)域隔離開。樣品準備區(qū)域的人員不得進入試劑準備區(qū)。
3 核酸提取區(qū)
核酸提取區(qū)是進行樣品核酸提取的區(qū)域。該區(qū)域為負壓,目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準備區(qū)又包括從樣品中進行核酸提取和純化的區(qū)域以及將核酸加到包含PCR主反應(yīng)混合液管中的操作區(qū)域。添加完樣品后,PCR管的蓋子要盡可能快地蓋好。使用PCR板和膠蓋時,陽性對照和含目標序列的樣品要與待測樣本分開操作,以避免模板添加時造成交叉污染
重要提示:這個房間里的一切物品不得帶人試劑準備區(qū)。
4 擴增和產(chǎn)品檢測區(qū)
該區(qū)域是用來進行PCR擴增和PCR分析的。PER儀放置在這個區(qū)域。房間保持負壓,目的是防止核酸溢出。在該區(qū)域人員一定要一直穿戴工作服和手套,在離開房間前脫去,防止擴增子污染其它地點。所有用于擴增和產(chǎn)品檢測的設(shè)備要指定用于這個房間。PCR分析]二作也設(shè)置在該區(qū)域,例如:酶切、測序、克隆等,但實驗室應(yīng)盡可能把這些活動分隔在不同區(qū)域或不同房間。以降低擴增產(chǎn)物的污染風險。如果沒有條件在該區(qū)域設(shè)立負壓,此區(qū)域必須建立排風裝置。