Q:檢測時空白對照的吸光度變<0.3,儀器無法正常檢測,應如何處理?A:出現空白對照的吸光度變<0.3的原因主要有以下兩點:一是試劑保存條件不當,以致酶試劑活性下降,正確的保存條件為4-8℃冷藏保存(試劑為干粉狀態(tài)時建議零下冷凍保存);二是檢測環(huán)境的溫度過低,農藥殘留檢測的最適溫度為38℃,若檢測環(huán)境的溫度低于15℃時,酶活性受到抑制,建議用戶進行必要的保溫措施(水浴、恒溫箱等),以確保實驗試劑的溫度不會過低。
3.索氏提取法:大多數農藥是脂溶性的,所以一般采取提取脂肪的方法,將經分散而干燥的樣品用無水或石油醚等溶劑提取使樣品中的脂肪和農殘進入溶劑中,再凈濃縮即可分析。適用谷物及其制品、干果、脫水蔬菜、茶葉、干飼料等樣品。無水或石油醚等溶劑,提取效率高,操作簡便。需要注意:提取時間長,消耗大量的溶劑必須考慮被測物的穩(wěn)定性;含水量過高的水果蔬菜不宜作為分析對象。4.液-液萃取法:向液體混合物中加入某種適當溶劑,利用組分溶解度的差異使溶質由原溶液轉移到萃取劑的過程。向溶液試樣加入非極性或水溶性的溶劑,用振蕩等方法來輔助提取試樣中的溶質。適合液態(tài)樣品,或經過其他方法溶劑提取后的液態(tài)基質。常用非極性的溶劑有正己烷、、乙乙酯;常用的水溶性溶劑有二烷、醇、乙、以及水。
在一定條件下,有機磷和氨基類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下,酶催神經傳導謝產物(乙酰膽堿)水解,其水解產物與顯色劑反應,產生黃色物質,用分光光度計測定412nm下吸光度隨時間的變值,計算出抑制率,通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基酯類農藥的殘留。